细胞冻存是细胞长时间保存的重要方法，使用冻存技术能将细胞置于-196℃低温保存数十年或更久，如在需要的时间再将细胞苏醒并繁殖，起到细胞保种的作用。
 

    使用材料

仪器：液氮罐、冻存管、离心管、吸管、离心机等

试剂：0.25%胰酶、造就基、冻存液

冻存液配制：造就基参加甘油或DSMO，使其终浓度达5-20%。

操作步聚

1.消化细胞，将细胞悬液网络至离心管中。

2.1000rpm离心10分钟，弃上清液。

3.沉淀加含掩护液的造就，计数，调解至5100/ml左右。

4.将悬液分至冻存管中，每管1ml。

5.将冻存管口封严。

6.贴上标签，标注明细胞信息和冻存日期。

7.室温→4℃(20分钟)→冰箱冷冻室(30分钟)→低温冰箱(-30℃ 1小时)→气态氮(30分钟)→液氮保存→样本库保存→需要时细胞复苏。